“這個實驗其實不不難，一共只分為兩步。”

“首先是聚合酶鏈式反應，即PCR擴增反應；第二步是酶切反應。”

張興運介紹道。

第一步，在PCR擴增反應部分，只需要跟著想要的結果，明確各種試劑和樣品的加入量以及擴增條件，按照正常的要求操作即可。

需要注意的是，吸取試劑時，一定要排盡氣泡，由于試劑的加入量都非常小，滴加試劑時，常常出現試劑聚集在槍頭尖端，形成一個小液滴，難以滴下，可以將液滴打到離心管內壁上。

利用其與離心管內壁的吸附作用力，將液滴留在離心管內。

最后，再用無菌超純水補足3滴反應體系后，將離心管蓋蓋好，至于離一t2機中，離心30秒，以使試劑、樣品和水在離心管底部充分混勻。

更有利于PCR反應的順利進行，可以大大增加擴增反應的成功率。

至于酶切反應。

可以在滴加實驗一得到的結果后，再滴加適量BSA，它是一種酶切反應催化劑，能夠使酶切反應進行更徹底。

酶切效果更好：通常試劑一與BSA的體積比約為1：2。

“我們在在川貝母的PCR鑒別試驗中，SmaI加入量為0。5斗l，BSA的加入量為1斗。滴加BSA后，酶切反應的體系仍為20斗，所以無菌超純水的加入量要相應減少。酶切反應的條件應設置為30，反應2h。”張興運說道。

陳浩然還是沉默。

但這種沉默已經代表了一種態度。

不贊同，不拒絕。就靜靜的看著，即便你作死也好，即便你成仙也罷，他都這么靜靜的看著。

當然，實驗室里面的實驗還在繼續。

“電泳檢測酶切反應完成后所得到的溶液。得到的結果是？”楊光問道。

“含有標準規定的長度在100～250bp的兩條DNA條帶，需要用瓊脂糖凝膠電泳法進行檢視。”終于回答道。

走到這一步，實驗的還在繼續。

但至少楊光并沒有再提出什么質疑。

鐘醫和楊光還是按照實驗步驟再進行，首先，需要制膠和配制電泳緩沖液，制膠用緩沖液和電泳緩沖液應保持一致，用百分之1的TAE或TBE即可。

“注意，在制膠過程中注意做好防護，切勿燙傷。”鐘醫提醒道。

“假好心。我會出事？”楊光沒氣的說道。

兩人，待膠溶液溫度下降至60℃左右時，滴加少量GelRed，振搖混勻后緩慢傾倒人插好梳子的膠槽中，他們盡量不產生氣泡，以免影響電泳效果。

待膠凝固并冷卻至室溫后。即可將其轉移至電泳槽中，準備電泳。

下一步，兩人依次將樣品、對照藥材、空白對照加入膠孑L中。

楊光特別小心，手十分穩，沒有戳破膠孑L邊緣或戳穿膠孔底部。以免影電泳效果。

“他們現在再加加樣緩沖液，這樣做主要是兩個作用。”

“一方面其密度較大，可使樣品沉積在膠孔底部，避免樣品上浮外溢，保障電泳條帶密集緊湊，防止擴散。”

“另一方面，其中添加染色劑。可以在電泳過程中指示前沿。電泳結束后。可將凝膠置于凝膠成像儀上進行檢視。”

張興運說道。

而楊光這么一路實驗坐下來，正如張興運在報告之中所寫的那樣。

在與對照藥材凝膠電泳圖譜相應的位置上，在100～250bp應有兩條DNA條帶，空白對照無條帶。

只有一點有點問題。

“為什么其中有一條條帶中出現彌散的情況？”楊光疑惑的問道。

“出現彌散的原因只可能兩種。”鐘醫想了想回答道：“一方面可能是制膠所用緩沖液與電泳緩沖液不一致，應保持一致。另一種，可能是電泳緩沖液長期未更換，緩沖鹽濃度變化，或緩沖液被污染，應及時更換緩沖液。”

鐘醫的回答打消了楊光的疑惑。

實驗做到這兒，楊光也明白了，鐘醫沒有撒謊，張興運的報告百分之百真實。

整個實驗的難點就在于酶切反應。

但是兩人都是實驗室的好手，自然不會因為這一點小問題出問題。

“現在華夏有什么重要是用了分子生物學技術在中藥鑒定方面嗎？我說的是已經有標準的。”楊光問道。

“目前僅有蘄蛇、烏梢蛇的分子生物學鑒別收入我國醫藥中標準，分別采用了PCR和聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態性鑒別方法。還有就是我們剛剛做的川貝了。”鐘醫回答道。

是的，分子生物學技術在中藥鑒定方面的應用方興未艾。

這是一場危機，也是一個機遇。

就如同DNA條形碼方法在中藥材鑒定方面取得較好的效果一樣。

中藥鑒定道阻且長，需要經驗鑒別、分子生物學技術、理化鑒別和顯微技術的共同合作。才能真正實現中藥材和飲片的明確鑒定，才能保障中藥和中醫產業的長足發展。

“我無話可說，我這邊讓你們過了。”楊光擺了擺手說道。

是的，從科學上，從實驗上，從藥理上，楊光都無話可說。

在鐘醫的指導下，楊光的這個研究嚴密到不可思議的一個地步，讓人想要從中早一點什么錯誤出來都特別的難。

聽到楊光這么說，外面已經傳來了壓抑不住的歡呼聲。

“張興運醫生這也太強了吧。他不是中醫嘛，竟然也能讓楊光啞口無言。”

“廢話，只要道理還是那個道理，那么掌握真理的人一定不怕什么的。”

“我們贏了嗎？這一局我們贏了嗎？”

“看來真理還是站在我們這一邊的。”

中醫院的眾人已經按捺不住喜悅了，紛紛的笑了起來，說話的聲音都開始變大了。

這還不是重頭戲。

幾大藥廠那邊也在交頭接耳，像是在商量著什么，雖然不知道他們小聲在說些什么。不過從他們眼神中流露出的渴望和饑渴，也能夠看出他們的目的了。

“我們哈市對這個藥志在必得啊。你們不知道，我們一到冬天就容易出現這些狀況，現在有一個藥這么好……”紀建同說道。

“等等。我們滬市可不會讓啊。”范樂生也連忙打斷了紀建同。

這才開始，藥廠就已經爭了起來。

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